酶是生物体中活细胞产生的一种具有催化作用的物质,与酸、碱等无机或有机的催化剂相比,酶是具有高的专一性的催化剂,且其化学本质是蛋白质,这说明酶是一种特殊的生命催化剂。

  1.1、影响酶反应的主要因素

  1.1.1、抑制剂的影响

  抑制剂是对酶反应速度有十分重要的影响。抑制可分为不可逆抑制和可逆抑制。常用的抑制剂中不可逆抑制剂有2种,一种是专一地和特定(侧链氨基酸)基团反应的试剂;另一种是根据酶的作用机制修饰酶的特定位点的专一性试剂。

  1.1.2、pH值的影响

  酶反应是在一定的条件下进行的,酸、碱既能影响酶的稳定性,也能直接影响酶的催化活性。酶都有一定的酸碱稳定性范围,超出这个范围后,酶就会变性失效。

  1.1.3、温度的影响

  温度既能改变酶反应本身的速度,也能导致酶蛋白变性失效,酶反应速度随温度升高而增大,但超过适温度后,反应速度随温度升高而下降。而且,由于温度使蛋白质变形是随时间累加的,导致不同的反应时间测得的适温度往往不同。

  1.2、酶的稳定型与保存

  1.2.1、酶的剂型

  酶制剂常以4种剂型供应,即液体酶制剂、固体酶制剂、酶制剂、固定化酶制剂。由于酶的特性使得如何提高酶的稳定性,延长其有效期是各行业需解决的问题。

  1.2.2、影响酶的稳定性因素

  ① 温度

  大多数酶可在低温条件下(0～4℃)使用、处理和保存。但有些酶的结构的稳定性与疏水键有关;许多酶可在液氮或-80℃中冻结保存;冰冻干燥也是一种好的有效方法。

  ② pH值和缓冲液

  大多数酶仅在各自特定pH值范围内稳定,超出此范围则迅速失效,缓冲液的种类有时也会影响酶的稳定性。

  ③ 酶蛋白浓度

  酶的稳定性因酶性质和度而异，一般情况下，酶蛋白在高浓度时较为稳定，而在低浓度时则易于解离、吸附,甚至易发生表面变形而失效。④氧化

  某些酶为巯基酶，可能由于巯基氧化而在空气中逐渐失活，这种情况下加入1mmol/L的EDTA或DTT等有助于增加稳定性。

  1.2.3、稳定酶的方法

  目前，稳定酶的方法有如下几种：添加底物抑制剂和辅酶，添加—SH保护剂，添加表面活性剂，添加某些低分子无机离子，作成固定化酶。